1. 引言

姜黄素(curcumin, Cur)是一种从姜科、天南星科植物中提取的多酚类化合物 [1]，具有抗菌、抗炎、抗氧化、抗肿瘤、调节肠道菌群及清除自由基等多种生物学作用 [2] - [7]。目前，姜黄素作为一种替代抗生素的绿色添加剂已广泛应用在动物生产中。如：姜黄素能够提高通过提高肉鸡 [8] [9]、猪 [10] 的抗氧化性能、增强机体免疫功能和改善肠道健康，进而提高其生长性能。对于反刍动物中而言，有研究证实姜黄素不仅能够提高绵羊的生产性能和羊奶质量，还可以促进睾丸的发育 [11] [12]。对于水产动物而言，已有研究证实，适宜水平的姜黄素能够促进大黄鱼 [13]、黄颡鱼 [14] 以及罗非鱼 [15] 的生长和饲料利用，提高其非特异性免疫力。姜黄素还能提高鱼类的肠道消化酶活性，改善肠道菌群组成，降低肠道炎性因子表达量，从而改善肠道健康 [16] [17]。此外，对建鲤 [18] 的研究发现，姜黄素对其肝组织有保护作用，能有效改善肝细胞DNA的损伤程度，调节其抗氧化能力及相关细胞因子分泌。

血鹦鹉因其体色艳丽、体型圆润、易于饲养而广受欢迎。为保持其圆润丰满的体型，常用高脂饲料投喂，而长期摄食高脂饲料常会导致其肝脏组织中脂质过度沉积患上脂肪肝病，从而对其生长造成负影响。因此，如何缓解血鹦鹉的肝脏损伤已经成为研究热点。目前，有关姜黄素作为饲料添加剂对血鹦鹉血液、肝脏生理生化指标的影响的研究尚未见报道。

故而，本研究以血鹦鹉为试验对象，用高脂饲料诱导血鹦鹉脂肪肝，在饲料中添加姜黄素，研究对其生长、部分血液和抗氧化指标的影响，旨为姜黄素在血鹦鹉配合饲料中的应用提供参考。

2. 材料与方法

2.1. 试验材料

2.1.1. 试验鱼

试验中所选用的750尾血鹦鹉由天津市嘉禾田源观赏鱼养殖有限公司提供，初始体重85.53 g ± 3.50 g。

2.1.2. 试验饲料

试验用饲料以进口鱼粉、大豆浓缩蛋白等为主要蛋白源，鱼油、豆油为脂肪源配置脂肪水平分别为8%、14%的饲料，分别记为正常脂组(Normal-fat diet, NFD)和高脂组(High-fat diet, HFD)，在高脂组中分别添加100、200以及400 mg/kg的姜黄素作为试验组。各原料粉碎后过60目筛，混匀后使用制粒机制成Φ = 1.5 mm的颗粒料，常温经72 h晾干后备用。饲料原料及常规营养组成见表1。

2.1.3. 试验鱼饲养及日常管理

试验鱼于正式试验开始前进行2周暂养，期间使用基础饲料(饲料脂肪水平为8%，不添加姜黄素)投喂。驯化结束后选取大小基本一致，体格健壮的个体随机分为5组，每组设置3个平行，每个水槽中随机放50尾试验鱼(初始体重85.53 g ± 3.50 g)。每日分别于上午9:00与下午17:00进行饱食投喂。试验用水为曝气48 h的自来水，水温26℃~28℃，pH值8.0~8.2，溶解氧6.0~7.0 mg/L，氨氮1.2~1.3 mg/L，养殖水槽使用电磁式空气泵24 h充氧。试验周期为8周。

2.1.4. 样品采集与测定

试验结束后，从各槽中随机取10尾试验鱼，取样前停喂1 d，使用丁香酚(1:10,000)麻醉后测定体重，而后尾静脉采取血样，血样样品离心10 min (4℃, 4000 r∙min⁻¹)，取上清液，于−80℃保存备用。取血后的试验鱼于冰盘上解剖取肝脏，取出后用4℃去离子水冲净，并按质量体积比1:9 (W/V)加入预冷生理盐水，制成10%组织匀浆液，离心10 min (4℃, 3500 r∙min⁻¹)，取上清液，于−80℃保存，以备肝脏抗氧化指标的测定。

血清葡萄糖(Blood glucose, GLU)、甘油三酯(Triglyceride, TG)及总胆固醇(Total cholesterol, CHOL)含量、谷草转氨酶(Aspartate transaminase, AST)、谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase, ALT)、肝脏超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)、过氧化氢酶(Catalase, CAT)、丙二醛(Malondialdehyde, MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase, GSH-Px)均采用南京建成生物工程研究所提供的试剂盒测定，具体测定方法参照说明书进行。

2.1.5. 试验指标的测定与计算

增重率(%)、存活率(%)、特定生长率(%/d)计算公式分别为

$增重率\left(WG\right)=\left(Wt-W_0/W_0\right)\times 100\%$，

$特定生长率\left(SGR\right)=\left(\ln Wt-\ln W_0\right)/t\times 100\%$，

$存活率=存活尾数/总尾数\times 100\%$。

其中：W₀为试验鱼初始平均质量(g)；Wt为试验鱼终末平均质量(g)；t为试验时间(d)。

2.1.6. 数据统计与分析

所有数据用平均值±标准误(Mean ± SE)表示，平均值和标准差由EXCEL软件计算得出。采用SPSS 21.0对试验数据进行单因素方差分析(ANOVA)，若差异显著(P < 0.05)，则进行Tukey多重比较分析。

3. 结果与分析

3.1. 不同姜黄素添加量对血鹦鹉生长性能的影响

由表2可知，各组试验鱼的存活率、增重率以及特定增长率均无显著影响(P < 0.05)。

注：同列中标有不同字母者表示组间有显著性差异(P < 0.05)，标有相同字母者表示组间无显著性差异(P > 0.05)，下同。

3.2. 不同姜黄素添加量对血鹦鹉血液指标的影响

由表3可知，投喂高脂饲料的试验鱼的TG、CHOL、GLU含量以及AST活性均显著升高(P < 0.05)，添加姜黄素后试验鱼的症状显著改善，200 mg/kg组的血脂、Glu含量以及转氨酶活性均回到对照组水平。

3.3. 不同姜黄素添加量对血鹦鹉肝脏生化指标的影响

由表4可知，投喂高脂饲料的试验鱼的SOD和GSH-Px活性均显著低于对照组(P < 0.05)，添加200 mg/kg以上姜黄素的各组试验鱼SOD、GSH-Px活性显著高于高脂组，MDA含量显著低于高脂组(P < 0.05)，各组的CAT活性均无显著影响(P > 0.05)。

4. 讨论

已有研究发现姜黄素对鱼类体重的调节呈现出一定的剂量依赖效应，但不同种类的最适添加量差异较大，如对草鱼 [19] 的研究发现，饲料中添加400、600 mg/kg的姜黄素能促进其生长，降低饲料系数；对黄颡鱼 [20] 而言，添加200 mg/kg姜黄素能获得最佳生长性能；而张宝彤 [15] 等的研究发现，添加30 mg/kg姜黄素即可显著提高罗非鱼平均增重率和特定生长率，显著降低饵料系数。但有关姜黄素对鱼类生长性能的报道结果不尽相同，杨雨生 [14] 等对黄颡鱼的研究结果发现，添加姜黄素对其生长性能无显著影响，本研究结果与之相类似，造成这些差异的原因与试验对象种类、规格、养殖条件、试验时间以及姜黄素的纯度、投饲频率等多种因素有关。

TG和CHOL的含量是反映机体脂类代谢能力的重要生化指标，血清中AST和ALT含量的增减可以反映肝脏是否发生损伤与病变。闫亚楠 [21] 等的研究发现，摄食高脂饲料的团头鲂，其血浆中GLU、TG含量、转氨酶活性以及肝脏TG含量均显著升高，表现出肝脏脂肪变性和氧化损伤，而添加白藜芦醇能有效缓解高脂诱导的团头鲂肝脏功能紊乱的状态。本试验与上述试验结果相类似，投喂高脂饲料后，血鹦鹉出现明显的高脂血症症状，同时，血清中的AST和ALT活性亦显著升高，推测血鹦鹉肝脏已经受损，而添加姜黄素后，这种状况得到改善，添加量为200 mg/kg时血脂、血糖以及转氨酶活性均回到对照组水平，这些结果证实姜黄素对于改善血鹦鹉的糖脂代谢、缓解肝脏损伤均有良好效果。

SOD和CAT是体内活性氧自由基的清除剂，GSH-Px是机体内广泛存在的过氧化物分解酶，MDA是脂质过氧化的最终产物，能间接反应膜系统受损程度和细胞损伤程度 [22]。研究发现，长期摄食高脂饲料会破坏机体新陈代谢过程中活性氧自由基的产生和消除这一动态平衡，其结果导致大量活性氧自由基(ROS)扩散到细胞的各个角落，改变一些生物膜的通透性，氧化一些脂类、蛋白质、酶和DNA引起机体，造成机体组织器官氧化损伤 [23]。本试验中，高脂组血鹦鹉的SOD和GSH-Px活性均显著降低，也在一定程度上印证了上述结果，说明长期摄食高脂饲料可能对血鹦鹉的肝组织造成了氧化损伤。而添加200 mg/kg以上姜黄素后，试验鱼的SOD、GSH-Px活性显著高于高脂组，MDA含量显著低于高脂组，说明姜黄素的加入从一定程度上减缓了这种损伤。在大黄鱼 [13]、黄颡鱼(杨雨生)以及大菱鲆 [24] 的研究中，都发现添加适宜水平的姜黄素能有效提高鱼体内部分组织的SOD、CAT、GSH-PX活性，降低部分组织中MDA含量，对提高鱼体抗氧化力，抵抗氧化应激具有良好效果。在曹丽萍等研究中 [18]，0.5%和1.0%的姜黄素可以有效地恢复肝损伤的建鲤的肝脏组织；上述姜黄素在鱼类上的研究结果都与本试验结果相互印证。

5. 结论

1) 本试验条件下，饲料中添加姜黄素对血鹦鹉生长和存活均无显著影响。

2) 血鹦鹉长期摄食高脂饲料，其血糖、血脂及转氨酶活性均显著升高，SOD、GSH-Px活性显著降低，表现出肝功能紊乱和氧化损伤，添加姜黄素后血鹦鹉的症状显著改善，200 mg/kg组试验鱼的血脂、Glu含量、转氨酶活性以及肝脏SOD、GSH-Px活性、MDA含量均回到对照组水平，因此，在本试验条件下，姜黄素的最适添加量为200 mg/kg。

基金项目

天津市科技计划项目(18ZXBFNC00210)；天津市教委项目(2019KJ033)。

NOTES

^*通讯作者。

参考文献